[关键词] 烧伤 巨细胞病毒 聚合酶链反应
Human Cytomegalovirus Infection of Burn Patients Zhang Jianping, Sun Zhigang,Xu Suju, et al.
(Department of Genetic Medicine, Bethune International Peace Hospital,Shijiazhuang (050082))
Abstract:Objective: To observe human cytomegalovirus (HCMV) infection in severely burned patients and its influence on case conditions. Method: HCMV-DNA level in wound, urine and serum samples from 50 severely burned patients and 50 healthy persons (as control) were examined by using PCR technique and HCMV-IgM, IgG levels by using ELLSA method. Results: All the results indicated that the positive rate of infection in severely burned patients was significantly higher than that of the control. Wound healing of the HCMV infected patients was slower than those without infection. Lymphocyte counts in peripheral blood in infected patients were higher than those without infection. Conclusion: Burn patients are susceptible to HCMV infection, especially at the early stage of burn.
Key words:Burn Human cytomegalovirus polymerase chain reaction▲
人巨细胞病毒感染的广泛性和危害性日益受到人们重视,尤其对于免疫力受损和免疫功能低下者危害更严重[1],本文用聚合酶链反应(PCR)技术观察了50例严重烧伤患者HCMV的感染情况,并与50例正常人的检测结果进行对照分析。
材料与方法
1.材料:
(1) 检测对象 烧伤创面采用SP-Ag等药物治疗的烧伤病人50例为观察组,男34例,女16例,年龄2~55岁,烧伤面积10%~97%,平均26.7%,Ⅲ°面积9~95%,平均16.9%。并发应激性糖尿病2例,严重肺部感染3例,肠道菌群失调3例。采集标本时间为烧伤后7~43天,平均13.7天,对照组为健康体检者50例,男37例,女13例,年龄26~57岁,平均34岁。
(2) 标本收集 无菌试管留取尿和深层创面分泌物,同时抽取被检者外周血查血常规,并分离血清,用于检测HCMV-IgG、IgM抗体。留部分创面分泌物做细菌培养。NDA扩增仪由PE公司生产,Taq酶购自Promega公司。
2.方法:
(1) DNA扩增 各取经过离心处理的尿液和创面分泌物标本2.5ul,在50ul反应体系中进行PCR扩增。
(2) 经8%聚丙烯酰胺凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外线灯下观察HCMV特异性133bp区带。
(3) 用ELISA法检测血清中HCMV-IgG、IgM抗体(试剂购自解放军302医院)。
结 果
1.用ELISA法检测血清结果:观察组血清HCMV-IgG阳性率为90%(45/50);对照组阳性率为80%(40/50);血清HCMV-IgM阳性率观察组为8%(4/50);对照组为0(0/50)。
2.PCR检测HCMV结果:对照组尿HCMV-DNA阳性率为8%(4/50),观察组尿HCMV-DNA阳性率为40%(20/50),X2=14.03,P<0.01。观察组创面分泌物中HCMV-DNA阳性率为18%(9/50),尿与分泌物均为阳性者3例,占6%。
3.创面分泌物中细菌培养结果:金黄色葡萄球菌15例,绿脓杆菌11例,变性杆菌5例,大肠杆菌3例,肺炎克雷伯氏杆菌2例,链球菌2例。
4.血常规结果:对照组白细胞计数平均为6.9±0.83×109/L,淋巴细胞为0.29±0.07,观察组白细胞9.8±1.63×109/L,淋巴细胞为0.374±0.09。
5.预后:观察组中48例治愈,2例死亡,其中1例尿HCMV-DNA阳性,另1例HCMV-IgM阳性,其它资料见表1。
讨 论
1.HCMV是一种机会致病菌,其感染的危害性和广泛性日益受到人们的重视,尤其对于免疫受损或低下者更为严重,本组烧伤病人的血清HCMV-IgM和尿中HCMV-DNA阳性率均明显高于对照组(P<0.01),表明烧伤患者更易感染HCMV。从表1可以看出,伤情愈重,则感染HCMV的机会愈大,感染HCMV的烧伤病人临床症状可能不突出,但多伴有不同程度的高热,持续在38~39°C左右,且淋巴细胞较高,有9例病人创面迁延不愈,这与文献报道一致[2]。一般来说,轻中度烧伤感染HCMV并不构成严重的威胁,但对于特重烧伤则会加重消耗,使免疫力更加降低。因此对特重度烧伤治疗中应该加强营养支持和免疫疗法,应该使用抗病毒的药物。
2.从表2中可以看出,烧伤病人伤后3周内与3周后感染HCMV的发生率在统计学上无差异,HCMV-IgM阳性发生率在3周后虽然高于3周内,可能是由于该抗体产生较慢所致,而尿HCMV-DNA、HCMV-IgG阳性发生率在3周内较高些。结果提示烧伤病人出现HCMV感染机会多在烧伤早期,因而预防HCMV感染即应从烧伤后开始进行。
3.HCMV-IgG阳性提示既往有过感染,该结果可作为参考分析用。HCMV-IgM则表示正在感染,病毒存在。如HCMV-IgG(+)而HCMV-IgM(一)、DNA(一
